El dengue es la enfermedad m\u00e1s importante transmitida por artr\u00f3podos que afecta a los seres humanos, lo que representa una carga enorme de salud p\u00fablica en los pa\u00edses afectados. Los s\u00edntomas suelen ser inespec\u00edficos, de ah\u00ed la necesidad de un diagn\u00f3stico precoz, sensible y espec\u00edfico del dengue para un manejo adecuado.<\/p>\n
El diagn\u00f3stico directo de la infecci\u00f3n por el virus del dengue (DENV) se basa en el aislamiento del virus, la detecci\u00f3n del genoma viral mediante la reacci\u00f3n en cadena de la polimerasa con transcripci\u00f3n inversa (RT-PCR) o la detecci\u00f3n del ant\u00edgeno de la prote\u00edna no estructural 1 (NS1).<\/p>\n
Los cient\u00edficos del Instituto Pasteur du Cambodge (Phnom Penh, Camboya) recopilaron y analizaron un total de 913 muestras de plasma, 1.555 de orina y 1.564 muestras de saliva obtenidas de 267 pacientes con infecci\u00f3n confirmada por dengue y con registros completos. Tambi\u00e9n se utilizaron las muestras cl\u00ednicas obtenidas de 20 pacientes hospitalizados por una enfermedad febril, no dengue, para evaluar la especificidad de los diferentes m\u00e9todos de diagn\u00f3stico en muestras de orina y de saliva. Estos controles no mostraron evidencia biol\u00f3gica de una infecci\u00f3n actual por el DENV (pruebas negativas para DENV por qRT-PCR, prueba NS1 negativa y ausencia de anticuerpos anti-DENV en el plasma emparejado.<\/p>\n
Se utiliz\u00f3 un ensayo ELISA para detectar NS1 en el plasma, la orina no concentrada y en la saliva sin diluir. En el plasma y en la orina, la prote\u00edna NS1 fue detectada mediante un m\u00e9todo ELISA de dos pasos. Tambi\u00e9n se utilizaron pruebas ELISA de captura, producidas por los propios laboratorios, para detectar anti-DENV IgM (MAC-ELISA) e IgA (AAC-ELISA) en el plasma, la orina no concentrada y las muestras de saliva sin diluir. El \u00e1cido ribonucleico (ARN) viral fue extra\u00eddo del plasma, a partir de saliva mezclada con medio de transporte viral (VTM) y a partir de orina concentrada, utilizando el Mini kit QIAmp Viral ARN (Qiagen; Hilden, Alemania). Las muestras de orina fueron concentradas usando el dispositivo 100K Microsep e ultrafiltraci\u00f3n (Pall Corporation; Port Washington, NY, EUA) para convertir un volumen inicial de 5 ml de orina en un volumen final de 280 \u00b5L de orina concentrada.<\/p>\n
Los ensayos de RT-PCR y NS1 demostraron una sensibilidad general de 85,4%\/63,4%, 41,6%\/14,5%, y 39%\/28,3%, en las muestras de plasma, orina y saliva, respectivamente. Cuando se recogieron muestras de orina y saliva en los mismos momentos de tiempo y se analizaron al mismo tiempo, la sensibilidad diagn\u00f3stica de los ensayos de detecci\u00f3n de ARN y NS1 fue 69,1% y 34,4%, respectivamente. Los an\u00e1lisis de detecci\u00f3n de IgG\/IgA ten\u00edan una sensibilidad global del 54,4%\/37,4%, 38,5%\/26,8% y 52,9%\/28,6% en plasma, orina y muestras de saliva, respectivamente. Las IgM fueron detectadas en 38,1% y 36% de las muestras de plasma y de saliva pero nunca en la orina.<\/p>\n
Los autores concluyen que, aunque el desempe\u00f1o de los diferentes m\u00e9todos de diagn\u00f3stico no es tan bueno en la saliva y la orina como en muestras de plasma, los resultados obtenidos por las QRT-PCR y por los anticuerpos ELISA anti-DENV, bien podr\u00edan justificar el uso de estos dos fluidos corporales para detectar la infecci\u00f3n por dengue en situaciones en las que la recogida de muestras de sangre no es posible. El estudio fue publicado el 25 de septiembre de 2015, en la revista\u00a0Public Library of Science Neglected Tropical Diseases.<\/em><\/p>\n