En la sangre materna, se pueden identificar los gl\u00f3bulos rojos fetales (GR), debido a las diferencias entre ellos y los gl\u00f3bulos rojos de adultos, como son la presencia de hemoglobina fetal (HbF), la falta de la anhidrasa carb\u00f3nica (CA), y la presencia de un ant\u00edgeno de grupo en particular.<\/p>\n
Cient\u00edficos del Centro de Postgrado de Educaci\u00f3n M\u00e9dica (Varsovia, Polonia) recolectaron muestras de sangre en EDTA de la siguiente manera: 20 muestras de donantes de sangre, Rh negativas, para evaluar la especificidad de ensayo, 18 donantes de sangre Rh-negativos y 18 muestras de sangre de cord\u00f3n RhD -positivas, para preparar mezclas similares a las de la FMH de 0,1% a 5%, y 14 donantes de sangre con variante Du para evaluar la especificidad de la prueba con anticuerpos anti-D y realizar 20 suspensiones con los gl\u00f3bulos rojos de 10 donantes de sangre RhD positivos. Se analizaron las muestras de sangre de 98 mujeres: 74 de las mujeres justo antes del parto y a la hora y 2 horas despu\u00e9s del mismo, 10 s\u00f3lo antes del parto, incluyendo cinco antes de las 40 semanas de embarazo, debido a anemia fetal, y 14 s\u00f3lo despu\u00e9s del parto.<\/p>\n
La cantidad y los par\u00e1metros de gl\u00f3bulos rojos fueron medidos con el analizador hematol\u00f3gico COULTER AcT diff2 (Beckman Coulter, Brea, CA, EUA) para poder preparar las mezclas de gl\u00f3bulos rojos con el porcentaje conocido de c\u00e9lulas fetales. El equipo utiliz\u00f3 tres m\u00e9todos de citometr\u00eda de flujo, incluyendo coloraci\u00f3n del ant\u00edgeno D, coloraci\u00f3n de la hemoglobina F (HbF) y coloraci\u00f3n de la HbF y de la anhidrasa carb\u00f3nica (CA). El cit\u00f3metro de flujo fue calibrado correctamente y en todas las muestras se analizaron 50.000 gl\u00f3bulos rojos utilizando el software FACSDiva y el FACSCanto II (Becton, Dickinson and Company, Franklin Lakes, Nueva Jersey, EUA). Los cient\u00edficos tambi\u00e9n llevaron a cabo la prueba de Kleihauer-Betke (KBT), que se basa en la resistencia de la HbF a la eluci\u00f3n con \u00e1cido mientras que la HbA se elimina de las c\u00e9lulas.<\/p>\n
Los hemat\u00f3logos encontraron que en todas las mezclas artificiales con concentraciones conocidas de FCT y KBT con un recuento de 10.0000 gl\u00f3bulos rojos se obtuvo una sensibilidad y especificidad similares satisfactorias. La KBT con un recuento de 2.000 gl\u00f3bulos rojos tuvo que ser descalificado debido a discrepancias significativas entre los valores esperados y medidos de FMH. El procedimiento de ensayo con anti-D era m\u00e1s f\u00e1cil y m\u00e1s corto que las pruebas restantes, pero puede ser utilizado para la evaluaci\u00f3n de la FMH en las madres RhD negativas con reci\u00e9n nacidos RhD positivos. En una muestra cl\u00ednica, era imposible poder distinguir los gl\u00f3bulos rojos fetales de las c\u00e9lulas F maternas en la KBT y las c\u00e9lulas fetales con anti-HbF, pero otras pruebas eran \u00fatiles.<\/p>\n
Los autores llegaron a la conclusi\u00f3n de que los m\u00e9todos que utilizan citometr\u00eda de flujo y anti-HbF, anti-D, y anticuerpos anti-HbF + anti-CA, as\u00ed como la prueba microsc\u00f3pica de Kleihauer-Betke para detectar las c\u00e9lulas de la sangre HbF-positivas, con recuentos de 10 000 gl\u00f3bulos rojos, ten\u00edan una sensibilidad y especificidad similares satisfactorias. En las cuatro pruebas, la correlaci\u00f3n entre los resultados esperados y obtenidos fue apropiado. Cada prueba ten\u00eda algunas ventajas y limitaciones en cualquier situaci\u00f3n cl\u00ednica. Por lo tanto, lo mejor es tener la oportunidad de realizar dos o tres ensayos en el laboratorio. El estudio fue publicado en la edici\u00f3n de agosto de 2016 de la revista International Journal of Laboratory Hematology.<\/em><\/p>\n