La primera referencia hist\u00f3rica de ANA son las c\u00e9lulas LE<\/strong> descriptas por Hargraves en 1948, cuando, en una punci\u00f3n de m\u00e9dula \u00f3sea, observaron la presencia de fagocitosis de material nuclear intacto opsonizado por autoanticuerpos. El factor responsable del fen\u00f3meno de c\u00e9lulas LE result\u00f3 ser una familia de autoanticuerpos que reconoc\u00eda diferentes constituyentes nucleares. Actualmente el pedido de c\u00e9lulas LE est\u00e1 en desuso<\/strong> y fue reemplazado por el pedido de ANA.<\/p>\n Historicamente estos anticuerpos se han denominado FAN (factor anti n\u00facleo)<\/strong> o ANA (del ingl\u00e9s, Anti- Nuclear Antibodies)<\/strong> y se interpretan como anticuerpos dirigidos contra ant\u00edgenos exclusivamente nucleares<\/strong>, dejando fuera los anticuerpos dirigidos contra ant\u00edgenos citoplasm\u00e1ticos<\/strong> u otras estructuras celulares<\/strong>, como aparato mit\u00f3tico<\/strong> o aparato de Golgi, <\/strong>por lo que se ha propuesto recientemente, en el primer consenso argentino, que la denominaci\u00f3n correcta seria anticuerpos antinucleocitoplasmaticos.<\/p>\n La solicitud de los ANA <\/strong>estar\u00e1 indicada en toda aquella situaci\u00f3n cl\u00ednica en la que se sospecha<\/strong> la existencia de enfermedad autoinmune subyacente<\/strong>. En el caso de que los ANA sean positivos, se solicitar\u00e1n m\u00e1s anticuerpos seg\u00fan la sospecha cl\u00ednica. Los ANA son poco \u00fatiles en ausencia de signos o s\u00edntomas de conectivopat\u00eda.<\/strong> Adem\u00e1s son poco espec\u00edficos,<\/strong> ya que pueden asociarse al uso de algunos f\u00e1rmacos (Lupus inducido por drogas) o enfermedades de otro origen como tumores o infecciones.<\/p>\n Los ANA son \u00fatiles<\/strong> cuando las manifestaciones cl\u00ednicas<\/strong> son sugerentes de enfermedad autoinmune como Lupus Eritematoso Sist\u00e9mico (LES), S\u00edndrome de Sj\u00f6gren (SS), Polimiosistis\/Dermatomiositis, Lupus asociados a drogas <\/strong>y hepatitis autoinmune.<\/strong> Su presencia no se relaciona con un espectro cl\u00ednico determinado, salvo en la artritis idiop\u00e1tica juvenil,<\/strong> en donde sirve como monitoreo y pron\u00f3sticos para estratificar los riesgos de uve\u00edtis. Tampoco tienen un significado espec\u00edfico, si bien t\u00edtulos elevados hacen m\u00e1s probable la presencia de enfermedad autoinmune, en especial en el LES.<\/p>\n La presencia de ANA<\/strong> es el denominador com\u00fan de muchas enfermedades autoinmunes<\/strong> sist\u00e9micas con relevancia cl\u00ednica demostrada. La frecuencia es especialmente alta en LES, S\u00edndrome de Sj\u00f6gren Esclerodermia, Enfermedad Mixta del Tejido Conectivo ,Polimiosistis \/Dermatomiositis, Lupus inducido por drogas y hepatopat\u00edas autoinmunes, entre otras. Muy \u00fatil en el monitoreo y pron\u00f3stico de artritis cr\u00f3nica juvenil (para estratificar riesgo de uve\u00edtis).<\/p>\n Su presencia en las distintas patolog\u00edas tiene valor diagn\u00f3stico, pron\u00f3stico y de monitoreo<\/strong>, sin embargo, estos autoanticuerpos tambi\u00e9n est\u00e1n presentes en infecciones, enfermedades malignas<\/strong> y tiroideas<\/strong> y aun en individuos sanos<\/strong> (particularmente en mujeres mayores de 40 a\u00f1os y en ancianos).<\/p>\n Hay enfermedades sist\u00e9micas autoinmunes que cursan con ANA negativos<\/strong>, por eso los s\u00edntomas y la exclusi\u00f3n de otros fen\u00f3menos son claves para el diagn\u00f3stico.<\/p>\n Si el grado de sospecha de conectivopat\u00eda es bajo, se puede dar por finalizado el estudio y valorar otros diagn\u00f3sticos.\u00a0En el caso de ANA negativos, <\/strong>pero con alta sospecha de conectivopat\u00eda,<\/strong> se proceder\u00e1 a tratar de identificar espec\u00edficamente los diferentes autoanticuerpos englobados dentro de los ANA, por ejemplo, hay que investigar la presencia de anti-SSA\/Ro<\/strong> ya que este ant\u00edgeno se disuelve con los fijadores improntas de HEP2.Otros de los anticuerpos a estudiar con alta sospecha cl\u00ednica y ANA negativo son: anti-ribosomal P <\/strong>y anti-Jo-1<\/strong> por ELISA u otro m\u00e9todo espec\u00edfico.<\/p>\n Se debe tener en cuenta que el resultado negativo no implica ausencia de enfermedad. Estos pueden observarse en pacientes con s\u00edndrome de Sj\u00f6gren, Polimiositis, Artritis reumatoidea, esclerodermia y en un subgrupo de pacientes con LES considerados ANA negativos \u2013 SSA\/Ro positivos con caracter\u00edsticas cl\u00ednicas particulares.<\/p>\n El t\u00edtulo tiene importancia diagn\u00f3stica<\/strong>, ya que el valor predictivo positivo<\/strong> aumenta a t\u00edtulos elevados<\/strong>. En un esfuerzo por reducir el n\u00famero de falsos positivos o resultados cl\u00ednicamente irrelevantes, los laboratorios comenzaron a informar los t\u00edtulos. En general, los pacientes con LES presentaban t\u00edtulos mucho m\u00e1s altos (>1\/160) que los individuos normales o con otras enfermedades.<\/p>\n La prueba de ANA positiva<\/strong> fue incorporada como uno de los criterios diagn\u00f3sticos de LES<\/strong> por el Colegio Americano de Reumatolog\u00eda<\/strong>. Para evitar resultados falsos positivos o falsos negativos, los laboratorios deben ajustar perfectamente sus condiciones de trabajo para interpretar los resultados correctamente, en especial buscando la diluci\u00f3n de corte que permita discernir mejor entre los individuos sanos y los enfermos.<\/p>\n Las variaciones en los t\u00edtulos de ANA no est\u00e1n directamente relacionados con las variaciones en la actividad de la enfermedad, a excepci\u00f3n de los t\u00edtulos de anti-DNA, cuya elevaci\u00f3n se relaciona con la actividad l\u00fapica y un mayor riesgo de nefropat\u00eda.<\/p>\n En distintos trabajos y gu\u00edas se comunican los porcentajes de positividad<\/strong> obtenidos en individuos sanos, siendo entre 25-30% para t\u00edtulos de 1\/40; 10-15% para 1\/80 y 5% para t\u00edtulos de 1\/160. En familiares sanos de pacientes con enfermedades autoinmunes suelen reportarse t\u00edtulos mayores de 1\/40 en un 25-30% de los casos. Esto demuestra el gran significado que tiene establecer un t\u00edtulo de corte en el laboratorio <\/strong>o bien utilizar un valor determinado en una poblaci\u00f3n y bajo condiciones de trabajo semejantes a las nuestras. Una gu\u00eda de Medicina Basada en la Evidencia para el uso de ANA <\/strong>recomienda informar junto al t\u00edtulo positivo el porcentaje de individuos sanos que presentan el mismo t\u00edtulo.<\/p>\n La determinaci\u00f3n de ANA<\/strong> debe informarse de manera dicot\u00f3mica (positivo o negativo)<\/strong>. El resultado positivo<\/strong> debe ser acompa\u00f1ado por el t\u00edtulo y el patr\u00f3n. <\/strong><\/p>\n La frecuencia de ANA<\/strong> en la poblaci\u00f3n general var\u00eda en funci\u00f3n de la edad y del sustrato antig\u00e9nico utilizado, ya que el n\u00famero de resultados positivos aumenta con la edad y es mayor en la IFI sobre c\u00e9lulas de HEP-2.<\/p>\n Los principales patrones que se distinguen por IFI son homog\u00e9neo, moteado, centrom\u00e9rico, nucleolar, <\/strong>y patrones citoplasm\u00e1ticos<\/strong> (como reticular, actina, etc).<\/p>\n El patr\u00f3n observado orienta hacia que anticuerpos especificos analizar. El \u00fanico patr\u00f3n que se asocia a una patolog\u00eda es el patr\u00f3n centr\u00f3merico<\/strong> y se asocia con la Esclerodermia Limitada<\/strong>. El patr\u00f3n nucleolar<\/strong> es frecuente en los pacientes con Esclerodermia Sist\u00e9mica<\/strong> (ES), pero puede verse en el LES y en el s\u00edndrome de Sj\u00f6gren. Los t\u00edtulos elevados de ANA <\/strong>con patr\u00f3n homog\u00e9neo<\/strong> o perif\u00e9rico<\/strong> sugieren el diagn\u00f3stico de LES.<\/strong><\/p>\n El t\u00e9rmino ENA (ant\u00edgeno nuclear extra\u00edble)<\/strong> incluye Sm, RNP, Ro (60 y 52 kd), La, Jo-1<\/strong>. Existe una relaci\u00f3n entre los patrones observados por IFI y los anti ENA aunque no absoluta ya que por IFI alc\u00e1nzamos a detectar 100 o 150 ant\u00edgenos y en los ENA estamos detectando 7 u 8 ant\u00edgenos.<\/p>\n El patr\u00f3n homog\u00e9ne<\/strong>o se asocia con anti DNA e histonas <\/strong>(lupus inducido por drogas). El patr\u00f3n moteado<\/strong> se asocia con u1RNP, Sm, Ro y La<\/strong>. El patr\u00f3n centr\u00f3merico<\/strong> se asocia a CENP-B<\/strong>. El patr\u00f3n nucleolar<\/strong> se asocia con Pm\/Scl y Scl70.<\/strong> El patr\u00f3n citoplasm\u00e1tico <\/strong>moteado se asocia a anti mitocondriales (AMA) <\/strong>asociado a cirrosis biliar primaria (CBP) <\/strong>o Jo-1 en Polimiositis,<\/strong> si el moteado es difuso<\/strong> de asocia a Rib P.<\/strong><\/p>\n Hay que tener en cuenta que la correcta interpretaci\u00f3n de los resultados requiere considerar:<\/p>\n La t\u00e9cnica de referencia <\/strong>es la inmunofluorescencia indirecta (IFI)<\/strong>. Al final de la d\u00e9cada del 50 se desarroll\u00f3 la t\u00e9cnica de IFI empleando como sustratos cortes criost\u00e1ticos de tejidos (h\u00edgado y ri\u00f1\u00f3n) de roedores (rata o rat\u00f3n), esta t\u00e9cnica demostr\u00f3 ser mucho m\u00e1s sensible, aunque con una disminuci\u00f3n en la especificidad diagn\u00f3stica que las c\u00e9lulas LE.<\/p>\n El uso de sustrato de h\u00edgado y ri\u00f1\u00f3n de roedores fue reemplazado por la l\u00ednea<\/strong> celular Hep-2<\/strong>, el cual es el sustrato de elecci\u00f3n en la actualidad, este sustrato es de mayor sensibilidad porque presentan mayor concentraci\u00f3n de ant\u00edgenos (100 a 150 ant\u00edgenos), por ej: SSA\/Ro, adem\u00e1s permiten la detecci\u00f3n de anticuerpos contra m\u00faltiples estructuras nucleares, citoplasm\u00e1ticas y relacionadas con la divisi\u00f3n celular. Al presentar los n\u00facleos un gran tama\u00f1o los patrones de fluorescencia son m\u00e1s f\u00e1cilmente visualizables. La cantidad de patrones observados con c\u00e9lulas Hep-2 se ha incrementado con los a\u00f1os hasta llegar, aproximadamente a 50, teniendo en cuenta no s\u00f3lo el te\u00f1ido nuclear sino tambi\u00e9n el citoplasm\u00e1tico y de diferentes organelas como ser mitocondrias, Golgi, nucl\u00e9olo y distintas estructuras del aparato mit\u00f3tico tales como huso mit\u00f3tico, centriolos, etc. Esto requiere de profesionales muy entrenados en la interpretaci\u00f3n de im\u00e1genes. La IFI sigue siendo de elecci\u00f3n ya que con t\u00e9cnicas como el ELISA tienen muchos falsos negativos por la menor cantidad de ant\u00edgenos. Los patrones permiten la orientaci\u00f3n en la especificidad antig\u00e9nica del anticuerpo, para luego utilizar un m\u00e9todo espec\u00edfico de identificaci\u00f3n como ELISA, Western Blot, Inmunoensayo Lineal, Dot Blot, entre otros.<\/p>\n En la determinaci\u00f3n de ANA por IFI se presentan diversos problemas:<\/p>\n Muchas son las variables que pueden intervenir en la calidad anal\u00edtica del resultado:<\/p>\n Microscopio.<\/p>\n<\/li>\n Recolecci\u00f3n y almacenamiento de las muestras.<\/p>\n<\/li>\n Elecci\u00f3n del sustrato.<\/p>\n<\/li>\n Conjugado fluorescente.<\/p>\n<\/li>\n Especificidad isot\u00edpica del conjugado: en la determinaci\u00f3n de ANA por IFI pueden ser usados tanto conjugados polivalentes (reactivos contra IgG, IgA e IgM) como conjugados anti-IgG espec\u00edficos. El 96% de los pacientes con LES producen ANA de clase IgG. La mayor\u00eda de los autoanticuerpos asociados a da\u00f1o, severidad o subtipos cl\u00ednicos en las enfermedades autoinmunes sist\u00e9micas son de clase IgG. Si se utiliza un conjugado IgG espec\u00edfico no podr\u00e1n ser detectados los ANA de clase IgM asociados con artritis reumatoidea, drogas o la edad. Sin embargo, s\u00f3lo 4% de los pacientes con enfermedades autoinmunes sist\u00e9micas producen cantidades significativas de ANA IgM espec\u00edficas<\/p>\n<\/li>\n Sueros de referencia<\/p>\n<\/li>\n Valor de corte<\/p>\n<\/li>\n<\/ol>\n Para individuos adultos<\/strong> se propone hacer el screening a la diluci\u00f3n de 1:80<\/strong> con una sensibilidad del 90 al 95% . En individuos m\u00e1s j\u00f3venes <\/strong>se recomendar\u00eda una diluci\u00f3n<\/strong> de corte de 1:40<\/strong>. Se debe fijar el valor de corte de la determinaci\u00f3n, o sea el t\u00edtulo a partir del cual el resultado es considerado positivo. La importancia reside fundamentalmente en poder definir un positivo con verdadero significado cl\u00ednico con muy buena especificidad y una adecuada sensibilidad.<\/p>\n Se propone que en el informe se consigne la siguiente informaci\u00f3n: nombre de la determinaci\u00f3n, m\u00e9todo sustrato, diluci\u00f3n de corte, resultados, identificando la fluorescencia nuclear, aclarando t\u00edtulo\/s y patr\u00f3n\/es, y la fluorescencia citoplasm\u00e1tica, aclarando t\u00edtulo\/s y patr\u00f3n\/ es, dejando un lugar para observaciones. Las im\u00e1genes que se deber\u00edan informar son las que aparecen en verde.<\/p>\n \n <\/p>\n Primer Consenso Argentino para la Estandarizaci\u00f3n de la Determinaci\u00f3n de Anticuerpos Anti-Nucleares por Inmunofluorescencia Indirecta\u2013HEp-2 First Argentine Consensus for Standardization of Antinuclear Antibodies by Indirect Immunofluorescence\u2013HEp-2 Primeiro Consenso Argentino para a Padroniza\u00e7\u00e3o da Determina\u00e7\u00e3o de Anticorpos Antinucleares por Imunofluoresc\u00eancia Indireta\u2013HEp-2 Orlando Gabriel Carballo1ae, Fernanda Beatriz Ing\u00e9nito2a, Alejandra<\/p>\n \n\u00bfCu\u00e1ndo deben solicitarse los ANA?<\/h4>\n
\u00bfEn que enfermedades aparecen los ANA positivos?<\/h4>\n
\u00bfPuede haber enfermedades autoinmunes con ANA negativos? \u00bfEn qu\u00e9 casos se debe solicitar anticuerpos espec\u00edficos con ANA negativos?<\/h4>\n
\u00bfTiene importancia que se informe el titulo?<\/h4>\n
\u00bfCu\u00e1l ser\u00eda el valor de corte de ANA en individuos sanos?<\/h4>\n
\u00bfLos patrones hallados se asocian a unos anticuerpos espec\u00edficos?<\/h4>\n
\u00bfPuede existir ANA positivos con ENA (ant\u00edgenos nucleares extra\u00edbles) negativos?<\/h4>\n
\u00bfQue tener en cuenta para interpretar correctamente los ANA?<\/h4>\n
\n
\u00bfCu\u00e1l es el m\u00e9todo de referencia, para evaluar los ANA? \u00bf y cu\u00e1l es el mejor sustrato?<\/h4>\n
\u00bfCu\u00e1les son los problemas relacionados con la t\u00e9cnica de IFI?<\/h4>\n
\n
\u00bfCu\u00e1les son las variables que intervienen en la calidad anal\u00edtica de los ANA por IFI?<\/h4>\n
\n
\u00bfC\u00f3mo se debe informar correctamente los ANA?<\/h4>\n
![\"autoanticuerpos\"](\"http:\/\/www.farestaie.com\/img\/varias\/img1909.jpg\" "\\"autoanticuerpos\\"")
<\/div>\nBibliograf\u00eda<\/h4>\n