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PRUEBA DE COOMBS
Sinonimia: prueba de antiglobulina, PAG.
Método: suero antiglobulina
Muestra:
prueba de Coombs directa: sangre entera anticoagulada con EDTA Na2
prueba de Coombs indirecta: suero
Valores de referencia: negativo
Significado clínico:
La prueba de antiglobulinas (PAG) se basa en el principio de que los
anticuerpos antiglobulina humana inducen la aglutinación de los
eritrocitos revestidos con globulina.
Cuando la PAG se utiliza para detectar anticuerpos fijados en eritrocitos
in vivo, se llama prueba directa de antiglobulinas o de Coombs (PCD).
Cuando la PAG se emplea para detectar anticuerpos en el suero por sensibilización
de los eritrocitos in vitro, se conoce como prueba indirecta de antiglobulinas
o de Coombs (PCI). Los sueros antiglobulinas que se obtienen de conejos
inmunizados pueden ser de amplio espectro (con anticuerpos contra inmunoglobulinas
humanas y componentes del complemento) o pueden ser monoespecíficos
(anti IgG, anti-IgM, anti-IgA, anti- C3+C4, anti C3b, anti-C3d, anti-C4b
y anti C4d).
Aunque la PAG de una prueba muy sensible, una prueba negativa no excluye
la presencia de anticuerpos en los eritrocitos (se calculan en 100 a 500
moléculas de IgG fijadas a los eritrocitos para que sean detectadas).
Prueba directa falsa positiva: algunas drogas incluyendo penicilinas
y cefalosporinas pueden causar PDC positiva:  -metildopa,
levodopa, quinidina, insulina, ácido mefenámico, sulfonamidas,
tetraciclinas. Los anticuerpos contra metildopa son predominantemente
IgG.
Observación no son estrictamente falsos positivos ya que estas
drogas pueden provocar anemias hemolíticas autoinmunes.
Causas de falsos positivos en PCD:
1- material mal lavado
2-restos de detergentes
3-muestra conservada en la heladera y no procesada de inmediato (hay activación
del complemento
4-exceso de refrigeración
5- lavado inadecuado de los hematíes de sangre de cordón
(gelatina de Wharton)
Causas de falsos positivo en PCI
ídem 1,2,4,
5-Solución fisiológica inapropiada, pH, resina de intercambio
etc
6-restos de componente monoclonal por lavado insuficiente
Prueba indirecta falsa positiva: la metildopa provoca aproximadamente
el 25% de PIC positivas en pacientes hospitalizados. La levodopa y el
ácido mefenámico también causan reacción positiva.
Utilidad clínica:
La prueba indirecta de Coombs se utiliza en los siguientes casos:
- - Screening de anticuerpos desconocidos en el suero usando hematíes
conocidos. Se utiliza principalmente para el screening de anticuerpos
pre-transfusionales y en el primer trimestre de embarazo.
- - Evaluación de anemias hemolíticas. Esta prueba se
usa en paneles, en titulaciones y en cross-matches.
- - Evaluación de antígenos: Muchos antígenos eritrocitarios
se detectan con esta prueba: Fy, K, k, S, s, como también antígenos
poco frecuentes como: Lua, Coa, Kpb
o variantes débiles de antigenos : Du, DVI,
Cw.
La prueba directa de Coombs se utiliza en los siguientes casos:
- - Diagnóstico de hemólisis autoinmune.
- - Diagnóstico de enfermedad hemolítica del recién
nacido.
- - Diagnóstico de hemólisis inducida por drogas.
- - Evaluación de reacción hemolítica aguda y retardada.
Variables por enfermedad:
Prueba positiva:
PIC: brucelosis, malaria, algunos pacientes con linfoma de Hodgkin,
20% de pacientes con leucemia linfocítica crónica, 33% de
pacientes con leucemia mielocítica crónica, púrpura
trombocitopénica idiopática con anemia hemolítica,
convalecencia de infección por Mycoplasma pneumoniae, lupus eritematoso
sistémico, eritroblastosis fetal (debido a anticuerpos Rh, Kel,
Kidd, Duffy).
PDC: lupus eritematoso sistémico.
Prueba negativa:
PIC: mieloma múltiple, eritroleucemia, abetalipoproteinemia,
macroglobulinemia de Waldenström, esferocitosis hereditaria, eliptocitosis
hereditaria, hemoglobinuria paroxística nocturna, poliarteritis
nodosa, enfermedad hemolítica del recién nacido debida a
incompatibilidad ABO.
Nota: tener en cuenta que de acuerdo a la concentración
del componente monoclonal puede haber falsos positivos
Variables por drogas:
Prueba positiva:
PIC: asparaginasa, carbromal, metildopa, rifampicina.
PDC: ácido aminosalícilico, ampicilina, ciclofosfamida,
insecticidas, isoniazida, ácido mefenámico, meticilina,
metildopa, penicilina G, quinina.
Bibliografía:
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5. Lockitch G. Handbook of Diagnostic Biochemistry and Hematology in Normal
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